共聚焦显微成像技术的开发不仅要突破光学、探测器、计算机视觉等跨学科知识壁垒和核心技术发展的挑战,其商业化还要解决仪器整合稳定性、应用复杂性以及用户需求多样性等应用难题。该技术自1950年代提出理论概念以来已历经60多年的漫长发展和演变,现阶段依然仅有少数厂商具备商业化的实力。
近期,北京艾锐精仪科技有限公司依托北京大学席鹏教授课题组的雄厚研发实力发布了自研的商用转盘共聚焦系统(Nova-SD),引发国内科研市场关注。
图1 北京艾锐精仪科技有限公司发布的转盘共聚焦系统(Nova-SD)
艾锐转盘共聚焦系统(Nova-SD)在技术原理上没有采用市场主流双转盘的共聚焦方案,而是采用对用户更为友好的单转盘技术方向进行创新,通过增大激发光功率的形式来弥补微透镜阵列的聚焦效应,避免了双转盘视野和分辨率受限、以及孔位容易错位的应用问题,实现了高速、高分辨率、高三维层切能力和大视野的“三高一大”优势。
图2 双转盘(左)与单转盘(右)对比。双转盘通过上层微透镜阵列将激光聚焦到针孔阵列,然而这一过程会限制二向色镜的大小与厚度,从而限制视野大小和成像质量
此外,该系统还可以和艾锐公司自研的偏振结构光显微镜、活细胞培养系统、成像分离器等产品组合应用,并在国内多家研究所完成了内测,在成像质量、灵活定制等方面获得了高度评价。
转盘共聚焦显微镜通常需要具备较快的速度对样本进行高分辨率扫描,同时需要相机具备高动态成像优势以适应复杂光路的成像需求,需要同时对光强较弱和较强的区域进行区分。鑫图Dhyana 400BSI V3(简称 400BSI V3)相机非常适合转盘共聚焦系统的整合应用:不仅提供高达95%量子效率和低至1.1 e-的读出噪声,确保在低光强下快速捕捉弱信号;采用的6.5 μm像元尺寸能很好地平衡高NA显微镜的空间采样率和灵敏度的需求,对样本进行清晰、高动态成像;高达100 fps@4.2MP的速度可以快速捕捉动态变化的信号,实现对样本的实时动态观察;同时整机轻量化和低功耗的设计可以进一步降低对系统资源的占用,非常有利于仪器系统的整合应用。